Хромогенные ферменты актиномицетов


Расширение круга сведений о присутствии тирозиназной и лакказной активностей у актиномицетов, образующих черные и бурые пигменты, позволило ввести эту характеристику в таксономическое описание многих видов группы Chromogenes и в сам определительный «ключ» [Красильников, 1970]. Из новых видов (n. sp.) «положительная тирозиназа» указана для Act. roseobrunneus, Act. ater, A. fuseospiralis, Act. griseocastaneus, Act. aculeatus, Act. brunneorectus, Act. colonorubeus и некоторых других видов; «положительная лакказа» — для Act. roseobrunneus, Act. fuseospiralis, Act, aculeatus, Act. brunneorectus и др.; «отрицательная лакказа» — для Act. ater, Act. griseocastaneus, Act. roseobrunneus и Act. colonorubeus.

Высокая тирозиназная активность была выявлена у производственной культуры — продуцента антибиотика Act. aureofaciens ЛСБ-2201 [Рябушко, 1974]. У так называемых нехромогенных актиномицетов — Act. globisporus, Act. badiocolor, Act. venezuela var. spiralis и Act. griseus variabilis — можно было получить положительную реакцию на лакказу или лакказу и тирозиназу одновременно [Зенова, Красильников, 1970]. Некоторые штаммы, не способные в предложенных им условиях окислять тирозин, легко окисляли введенный в среду ДОФА. В этом случае их активность называли ДОФАоксидазной. Она могла присутствовать вместе с тирозиназной (и определяться тем же ферментным белком), а также и с лакказой. Примеры таких форм можно найти в работах советских и японских авторов [Зенова, Гузева, 1970; Arai, Mikami, 1972]. В последней работе приводится список из 17 культур, окисляющих как L-тирозин, так и L-ДОФА до меланина: Str. afghaniensis, Stt, bellus, Str, caelestis, Str. eurythermus, Str. filipinensis, Str. lanatus, A. lavendueocolor, Str. litmocidini, A. longisporus, Str, massasporeus, Str. michiganensis, Str. narbonensis, Str. pi- losus, Str. phaeochromogenes и Str. toxytricini.

Было показано, что Act. brunneorectus выделял в среду и тирозиназу и лакказу [Красильников, 1970; Красильников и др., 1974а], но в клетках накапливал, по-видимому, только лакказу, которая лучше всего окисляла пирогаллол, а затем (в убывающей последовательности) — пирокатехин, гидрохинон и гваякол. Было отмечено совпадение во времени между интенсивностью синтеза этой лакказы и синтезом внутриклеточного пигмента. Пик активности фермента приходился на 7-суточную культуру, подходящую к концу экспоненциальной фазы роста. Максимальное количество пигмента накапливалось в старых культурах [Красильников и др.,1974в].

Два штамма актиномицетов, принадлежащих к сериям Chartreusis и Violaсеоrectus, в жидкой минеральной среде с глюкозой и аспарагином синтезировали пигмент, появлению которого предшествовало накопление в среде моно— и диоксифенолов, а также усиленный синтез фенолоксидазы лакказного типа. Полагают, что между этими процессами существует прямая связь: образующиеся под действием лакказы хиноны далее полимеризуются в пигмент меланинового типа уже аутоокислительным путем [Gulyas, 1977].