Изоэлектрические точки изоформ ЕА и EВ лежали в основной части шкалы pH. Определение молекулярных масс обоих изоферментов дало величины 41000 и 38500, которые были более близки к значениям, полученным для тирозиназы Neurospora crassa (33000), чем для тирозиназ млекопитающих — мышей и хомячков (55000 и 70000 соответственно). Кинетические константы для L-тирозина и L-ДОФА были следующими: Кm (с L-тирозином) = 3,1 мМ (для обоих изоферментов) и Кm (с ДОФА) = 36 мМ для ЕA и 67 мМ для EB. Эти значения превышали Кm фермента меланом в 10 раз для L-тирозина и в 100 раз для L-ДОФА. Величина V для тирозина также была одинаковой для обоих типов бактериального фермента, тогда как для ДОФА она составляла 110 и 140 соответственно для ЕA и EB. Число оборотов фермента с L-тирозином достигало 6000, с L-ДОФА — 4500 (ЕA) и 5400 (EB).
Конверсия L-тирозина в L-ДОФА ингибировалась диэтилдитиокарбаматом с Кi = 2,67•10-4 М,
причем кинетика ингибирования носила неконкурентный характер. Если инкубация c диэтилдитиокарбаматом (0,01 М) была непродолжительной (1 час) и сопровождалась последующим диализом против 0,05 М фосфата натрия (pH 6,8), то инактивация оказывалась в значительной степени обратимой и могла быть устранена инкубацией с 10-5 М Cu+2, Mn+2, Cd+2 или Fe+2. Длительная обра- ботка (30 час) приводила к полной и невосстановимой утрате тирозиназой активности. В рассма- триваемой работе [Pomerantz, Murthy, 1974] для V. tyrosinaticus априорно принималась обычная схема окисления тирозина тирозиназой с конечным образованием меланина: тирозин —> 3,4-ди- оксифенилаланин (ДОФА) —> ДОФАхинои —> 2,3-дигидро-5,6-диоксиндол-2-карбоксилат —> —> 2,3-дегидроиндол-5,6-хинон-2-карбоксилат (ДОФАхром) —> —> —> —> —> —> меланин.
Более поздние исследования химии тирозинтирозиназной реакции именно у V. tyrosinaticus позволили обнаружить еще одно звено — 6-оксиДОФА (2, 4, 5-триоксифенилаланин), которое, по мнению авторов, в синтетической цепи стоит непосредственно за ДОФА. Из этого соединения можно было получить ДОФАхром под действием очищенной грибной тирозиназы. Его идентификация (в форме 2, 4, 5- триметоксифенилаланина) была проведена путем сравнения с аутентичным синтетическим образцом на основании данных микроанализа, ИК-спектра и спектра ЯМР [Lunt, Evans, 1976].