О защитном действии изолированного пигмента


Более прямые доказательства существования защитных свойств у меланинов грибов были получены при использовании известного метода облучения слаборезистентных микробных клеток в растворе протекторного вещества (в данном случае меланина). Объектами защиты были конидии Pen. lilacinum, не имеющие черного пигмента и высокочувствительные к УФ-свету [Жданова и др., 1970; 1973а]. Облучение проводили с помощью лампы ВУВ-15 с мощностью светового потока 38,80 эрг/мм2/мин. в 1%-ном растворе (pH 9) меланина, выделенного из Cladosporium 396. Предварительно было установлено отсутствие неблагоприятного влияния щелочной среды (pH 9) на прорастание конидий пеницилла и образование из них колоний. В экспериментах использовали две фракции пигмента, обозначенный как 3а и 3б, которые различались прежде всего по растворимости (первая характеризовалась широким спектром растворимости, вторая — узким). Вероятно, это являлось отражением разницы в уровнях полимерности веществ, что косвенно подтверждалось их другим существенным отличием: концентрация ПМЦ у фракции 3а составляла 1,73•1018, а у фракции 3б-9,70•1018. Наибольшим защитным действием обладало вещество 3а, раствор которого полностью снимал эффект УФ-облучения при 4-часовой экспозиции, соответствующей дозе 9312 эрг/мм2. При использовании фракции 3б защита от УФ-света была выражена слабее. Причина этого различия неизвестна. Конидии Pen. lilacinum, облученные в воде, отмирали очень быстро. Сублетальная доза в этом случае соответствовала всего лишь 390 эрг/мм2 (или 10-минутному облучению [Жданова и др., 1970].

Далее было показано, что уровень защитного действия раствора определялся концентрацией содержащегося в нем меланина, и в первые минуты облучения (от 5 до 20 мин.) гибель облучаемой популяции осуществлялась по экспоненте с прямо пропорциональной зависимостью угла наклона кривой от количества пигмента в растворе. Однако на следующем этапе ход кривых отмирания изменялся и появлялись «длинные» плато резистентности [Жданова и др., 1973б]. Авторы полагают, что этот феномен представляет собой не отражение собственной гетерогенности популяции Pen. lilacinum, поскольку контрольная кривая имеет экспоненциальную форму на всем протяжении, а являются результатом постепенного перехода пигмента в более активное состояние. Опыты с предварительно облученным пигментным раствором, в который «под лучом» добавлялась конидиальная суспензия Pen. lilacinum, подвергавшаяся затем, облучению, завершились результатами, которые также можно трактовать как замедленное проявление защитного действия меланина (оно становилось максимальным после 40-минутной экспозиции). Особенно сильно этот эффект проявлялся в варианте с фракцией 3б. Практически представленные данные явились признанием двухэтапной системы защиты меланином клеток грибов от УФ-света. Первый этап обеспечивался экранирующим эффектом, второй — электронодонорной способностью пигмента, активированной после продолжительного УФ воздействия [Жданова 1977].