Защитное действие N-формилрадикала


Радикалами в этом случае могли быть группы N-карбобензокси; t-бутоксикарбонил или N-формил. Их отщепление от полученного продукта легко осуществлялось химическим путем. Максимальный выход L-ДОФА составлял 25-30% от L -тирозина после 44-часового культивирования Cliocladium deliquescens или Asp. ochraceus на соевой среде с декстрозой (50 мл) и добавкой 1,5 г R-тирозина и 900 мг аскорбиновой кислоты (дробное введение). Последняя вводилась в системы для разрыва цепи реакций синтеза меланина сразу же после стадии образования ДОФА.

Защитное действие N-формилрадикала в молекуле L-тирозина подтвердилось и на мутанте Pseudomonas D101, полученном под действием УФ-облучения почвенного штамма PL [Singh et al., 1973]. Выход L-ДОФА в экспериментах с производным возрастал с 15,0 до 23,0% при 1%-ной концентрации субстрата, В присутствии аскорбиновой кислоты (0,5%) накопление L-ДОФА достигало 26,2%из L-тирозина и 4 1,5% — из N-формил-L-тирозина. Препятствием для отбора этого штамма в качестве промышленного продуцента явился низкий предел оптимальной концентрации субстратов — не выше 1%.

Окислительная активность в отношении N-формилтирозина была обнаружена также у 11 штаммов Aspergillus sp. и у 15 штаммов актиномицетов. Один из последних, Str. roseochromogenes 71-23, давал 52- и 45%-ные выходы L-ДОФА (соответственно с аскорбиновой кислотой и без нее), т.е. более высокие, чем было получено раньше [Shibaca et al., 1974]. Оптимальная концентрация аскорбиновой кислоты составляла 20 мг/мл. Наиболее интенсивное образование N-формидДОФА приходилось на стационарную фазу роста культуры при оптимальном для процесса значении pH 7,2 (для роста культуры pH-оптимум не превышал 6,5). Отмечено стимулирующее действие дрожжевого экстракта на синтез ферментной системы, осуществляющей окисление N-формилтирозина. В качестве ферментного препарата могли быть использованы не только растущие клетки актиномицета, но и бесклеточный экстракт.