ИК-спектры одноименных фракций клеточных и внеклеточных меланинов также не совпадали. Фракции из культуральной жидкости актиномицетов, по одним данным [Малама и др., 1975], содержали значительно больше азота, чем его находили в клетках, — соответственно 7,25 и 10,99%, с одной стороны, и 1,98 и 3,61% — с другой (для фракций 2 и 3). По другим данным [Храменко, 1975], полученным на том же объекте Actinomyces robeofuscus ЛВ-3, столь большого различия в содержании азота не было — соответственно 8,88 и 9,0% (культуральная жидкость) и 7,61 и 8,05 (мицелий, фракции 2 и 3). В первом случае, однако, культивирование проводили на пептонсодержащей среде Шевчика, некоторые компоненты которой могли, по-видимому, включаться в макромолекулу внеклеточного пигмента (такие случаи известны).
Во втором случае среда для культивирования точно не указана.
К этим данным мы еще вернемся при обсуждении сходства меланиновых пигментов микроорганизмов с гумусовыми веществами почв. Углеводы найдены только в препаратах меланина из мицелия. Во всех пигментах определены остатки 14 аминокислот [Храменко, 1975].
В составе внеклеточных меланоидных пигментов девяти изученных штаммов Act. brunneorectus было обнаружено 5 хроматографически разделяемых фракций — бурая, желто-бурая, желтая, лимонно-желтая и красная. Бурая фракция плохо растворялась в органических растворителях и в большинстве применяемых систем оставалась на старте. Ее УФ-спектр совпадал со спектром комплексного меланоидного пигмента (плато и пики в области 252-268 и 230-290 нм [Красильни- ков и др., 1974а].
При щелочной экстракции и очистке черно-коричневого внутриклеточного пигмента тех же штаммов Act. brunneorectus он был разделен на 4 фракции: кислоторастворимую (желтого цвета), спирторастворимую (темно-коричневого цвета), ацетоновую (такого же цвета) и «меланиновую», которая в сухом состоянии представляла собой аморфный черно-коричневый порошок. Последний пигмент давал положительные тесты с нитратом серебра и сильными окислителями, не растворялся в воде, концентрированной НСl, тетрагидрофуране, обычных органических растворителях, слабо растворялся в пиридине, горячей концентрированной H2 SO4, но хорошо растворялся в NaOH. Продукты щелочного десмолиза имели характерный спектр и давали с реактивом Эрлиха положительную реакцию.
Его элементный состав (%): С-57,98; Н-5,40; N-3,26. Максимумов поглощения в видимой и ультрафиолетовой областях он не имел. Наклон прямой в диапазоне 410-600 нм составлял 0,0020-0,0027 (штаммовые различия), коэффициенты поглощения (E0,001%/1см; λ=465 нм) — от 0,028 до 0,35. В кислотном гидролизате пигмента были обнаружены остатки 17 аминокислот.