Были сделаны попытки выяснить место реакций, идущих с участием Cu+2 в биосинтезе аспергиллина, но они не дали определенных результатов. Известный Cu-хелатор, 2,4-дитиопиримидин (ДТП), который был привлечен для блокады реакций in vivo, максимальную активность проявлял в период, совпадающий с максимальной скоростью синтеза аспергиллина. Этот эффект (концентрация ингибитора 125-400 мкг/мл) частично снимался экзогенной медью, как можно было судить по некоторым косвенным показателям, поскольку прямые эксперименты оказались неосуществимыми из-за образования в среде нерастворимого желтого комплекса ДТП с Cu+2,Механизм внутриклеточного взаимодействия ДТП с Cu+2 имеет, по-видимому, какие-то свои особенности по сравнению с обычным хелатированием, поскольку диэтилдитиокарбамат и купризон, другие сильные хелаторы меди, не воспроизводили картину действия ДПТ и не ингибировали синтез пигмента.
Щелочные экстракты культур, обработанных ДТП, содержали две пигментные фракции — «бурую» с молекулярной массой 5000- 6000 и «зеленую» — 368. Последняя фракция имела, вероятнее всего, гексагидроксильную пентациклическую структуру. Полагают, что она представляет собой промежуточный этап синтеза аспергиллина. Фракция бурого пигмента ДТП-ингибированных культур по ряду характеристик была близка к фракции, обнаруженной в культурах, ингибированных диметилсульфоксидом (ДМСО), действие которого так же, как и действие ДПТ, проявлялось непосредственно перед периодом максимальной скорости накопления пигмента, установленным для необработанных культур. В отличие от действия ДТП эффект ДМСО ни в какой степени не сни- мался Cu+2. Ингибированные этим соединением культуры показали дефицитность по фенольным соединениям и присутствие бурой фракции, которая также рассматривается как промежуточная фаза в синтезе высокомолекулярного пигмента. На основании рассмотренных данных предложена схема синтеза аспергиллина, согласно которой хромофорная часть пигмента синтезируется до конечной полимеризации в нативный пигмент. Высокомолекулярное соединение, имеющее ненасыщенные хромофорные участки, насыщает их пентациклическими хиноидными производными. Необходимо отметить, что попытки подтвердить последовательность реакций in vitro на бесклеточных препаратах по каким-то причинам оказались безуспешными [Ray, Eakin, 1975].