Активная физиологическая функция тирозиназы у Asp. nidulans


В основу заключения об активной физиологической функции тирозиназы у Asp. nidulans в этих обстоятельствах положены наблюдения трех типов: 1) тирозиназа присутствует как во фракции частиц, так и в растворимой фракции; 2) она имеет низкое сродство к кислороду, и ее активация in vivo происходит так, как если бы уровень клеточного кислорода поднялся (например при репрессии митохондриального дыхания в условиях режима высоких скоростей разбавления); 3) скорость поглощения кислорода заметно падает под воздействием аналога тирозина — DL-β- фениллактата, выступающего одновременно ингибитором тирозиназы у этого организма [Bull, Carter,.1973].

К этому надо добавить, что, кроме обратной корреляции между количеством тирозиназы и количеством меланина, была обнаружена аналогичная зависимость между числом изоферментов тирозиназы и интенсивностью синтеза пигмента при исследовании соответствующих возрастных изменений стационарных культур [Martinelli, Bainbridge, 1974]. Характер зимограмм материала из диких и мутантных штаммов, сопоставленный с динамикой развития культур, заставил авторов сделать заключение о небольшой доли вероятности того, что все изоформы тирозиназы Asp. nidulans участвуют в синтезе меланина. Им кажется более логичным предположение о выполнении некоторыми из них существенных функций в активном росте. Изофермент, присутствующий на стадии активного роста и отсутствующий на стадии накопления меланина, относился к термолабильному типу, и его функциональная нагрузка вообще не была ясна, поскольку полное отсутствие такого фермента у одного из мутантов никаких видимых проявлений не вызывало, и организм хорошо рос и с течением времени прекрасно меланизировался.

Вопрос о временном несовпадении и вообще о связи меланиногенеза с тирозиназной активностью у Asp. nidulans осложняется синтезом внутриклеточного белкового ингибитора тирозиназы, хотя этот аспергилл не составляет в данном отношении исключения среди грибов, синтезирующих тирозиназу и меланин. Из новых «находок» укажем на присутствие подобного ингибитора у Sclerodum rolfsii [Miller, Liberta, 1977].

У Asp. nidulans это соединение осуществляет неконкурентное ингибирование тирозиназы, не устраняемое диализом как у N. crassa. Более того, диализ препарата фермента Asp. nidulans мог привести к полной его инактивации. По размеру молекулы ингибитор почти соответствовал размеру мономера фермента (1,5•105) и так же, как и он, содержал большое количество РНК, т.е. являлся, по-видимому, нуклеопротеидом. Авторы предполагают (но не высказывают полной уверенности), что этот ингибитор действует как надежный механизм, предотвращающий «невыгодный» в условиях высокой скорости роста или высокого разведения отток углеродных скелетов на синтез меланина. Однако как происходит данный процесс и как и почему он прекращается, остается совершенно неясным [Bull, Carter, 1973]