Электронно микроскопическое изучение штамма


Похожие картины можно было наблюдать на ультратонких срезах вегетативных клеток черных дрожжей Nadsoniella nigra var. hesuelica и ее мутантов (Рубан, Волкова, Лях, 1968; Рубан, Лях, Волкова-Козлова, 1969). Пигмент исходного штамма локализуется в наружной части клеточной стенки, в виде отдельного слоя с чрезвычайно плотной упаковкой пигментных гранул. При почковании дочерняя клетка, еще не отделившаяся от материнской, уже имеет четко выраженный пигментный слой. В перегородках, на стадии их формирования, меланина нет, но к моменту разъединения клеток он появляется. У мутантов с замедленным и ослабленным пигментогенезом наружный пигментный слой представлен отдельными гранулами и их конгломератами, в особенности у молодых культур. У мутанта с экзогенным накоплением пигмента обращает на себя внимание заметно более рыхлая упаковка гранул в клеточной стенке и многочисленные хорошо оформленные уже внеклеточные гранулы, как бы отваливающиеся от ее поверхности.

Кемпбелл (Campbell, 1968, 1969), проследивший электронно микроскопически за изменением ультраструктур меланизированных диктиоспор Гриба Alternaria brassicicola при их формировании, развитии и созревании, установил, что отложение меланина в них начинается очень рано, с момента начала формирования спор, но, за исключением самой последней стадии — созревания, ограничивается первичной клеточной стенкой и перегородкой, которые постепенно становятся все более гранулярными и менее прозрачными для электронов. Во вторичной (внутренней) стенке он почти не депонируется. Каким образом и почему накопление меланина происходит только в слое клеточной стенки, наиболее удаленном от протопласта, остается неясным, но каждая клетка зрелой споры этого гриба имеет двухслойную клеточную стенку, бесцветную изнутри и меланизированную снаружи. Прозрачная для электронов полоса, которая разделяет на две части поперечную перегородку, при созревании споры может становиться очень темной. Споры отрываются от цепи очень аккуратно, без разрывов в меланизированном слое стенки. Электронно микроскопическое изучение штамма показало, что меланин образует микрофибриллярные выросты на поверхности мицелия гриба (Pirt, Rowley, 1969).

Таким образом, все исследователи, специально занимающиеся этим вопросом, отмечают локализацию меланопигмента в наружном слое клеточной стенки. Они усматривают в этом поверхностном расположении меланина особый смысл и придают ему большое значение при образовании этих соединений у грибов. Меланины обычно прочно связаны с другими компонентами клеточных стенок, в среду не выходят и извлекаются из них в эксперименте с большим трудом.