Фракционирование на сефадексах


Все эти данные об определенном сходстве почвенных гуминовых кислот с микробными пигментами меланинового и гуминового типа, а также известный факт широкого распространения в богатых гумусом почвах микроорганизмов, синтезирующих подобные соединения, вызывает у некоторых авторов [Felbeek, 1971] вопрос, может ли экстракт природных гумусовых кислот быть свободным от этих микробных метаболитов. В этом отношении особенно поучителен пример с фракцией Р гуминовых кислот, обнаруженной во многих почвах мира и четко приуроченной к определенным условиям почвообразования, Она известна под названием «зеленой гуминовой кислоты», легко идентифицируется по максимумам поглощения при 613, 568, 448, 430 и 281 нм и предположительно является производным 4,9-диоксиперилен-3,10-хинона (напомним, что перилен — это пятиядерная конденсированная ароматическая система). Для нас эта фракция особенно интересна тем, что, как показали исследования японских [Kumada, 1965; Kumada, Sato, 1967; Kumada, Hurst, 1967] и советских авторов [Орлов, 1968; 1974, с. 165-168; Вольнова, Мирчинк, 1972 а, б], своим появлением в почве она обязана микоризообразующему грибу-космополиту Cenococcum grani forme, а также, по-видимому, и некоторым другим темноокрашенным грибам (Alrernaria tenuis, Aureobasidium pullulans и др.). Cenococcum graniforme синтезирует и накапливает это со- единение в мицелии и склероциях, Alternaria tenuis и некоторые другие — в мицелии. В эксперименте «зеленая гуминовая кислота» извлекается из биологического материала водной щелочью в составе «меланиновой фракции» (определяя наличие в ней пиков поглощения при 450, 570 и 620 нм). Она сохраняется в этой фракции при кислотном осаждении и повторной солюбилизации, но может быть отделена от нее фракционированием на сефадексах.