ИК-спектры препаратов внутриклеточного меланина


Спектроскопические исследования показали следующее. Характеры УФ-спектров пигмента исходного штамма, снятых в кислой, щелочной и нейтральных средах, мало отличались друг от друга и от спектров синтетических меланинов. Однако у пигментов мутантного штамма картина была иной. Так, у меланина 1-365к в кислой среде наблюдался подъем при 260—270 ммк, в воде он был несколько сдвинут к длинноволновой области (270 ммк), в 0,5 н. NaOH его не было совсем. У пигмента подъемы (при 235 и 285 ммк) были только в щелочной среде.

Интересно, что слабое увеличение поглощения (в щелочной среде) при 285 ммк было обнаружено также у меланина, полученного при окислении тирозина картофельной тирозиназой (Stein, 1954). Однако о сходстве этих пигментов говорить не приходится, ибо микробный пигмент, как показал элементарный анализ, содержал только следы азота.

Исходя из некоторого различия в УФ-спектрах пигментов мутанта 1-365 в системах с кислым, нейтральным и щелочным значением pH, нельзя исключить, что пигменты находятся в них в неодинаковых состояниях, хотя ничего более определенного по УФ-спектрам сказать нельзя.

Спектры поглощения в видимой области (400—700 ммк) у всех синтетических меланинов были одинаковыми, у природных же пигментов существенно различались: спектр пигмента штамма 365 имел форму прямой линии, спектры пигментов мутантного штамма (при большой начальной оптической концентрации) показали резкое снижение поглощения в области 400—480 ммк.

ИК-спектры препаратов внутриклеточного меланина штамма 365 имеют два хорошо выраженных максимума поглощения, приходящиеся на 1630—1720 см-1 (6 мк), что, возможно, свидетельствует о присутствии в этих веществах карбонилов (1720 см-1) при сопряженных связях С—С (1630 см-1). Еще один максимум, в области 3 мк (3300—3500 см-1) особенно четко виден на ИК-спектре пигмента, который не подвергался гидролитической обработке. Интересно, что в спектре ацетонрастворимой фракции гидролизованного пигмента он отсутствует. Поглощение в этой области характерно для групп NH2 и —ОН. Небольшие пики при 2856 и 2930 см-1 могут принадлежать группам СН2. Сопоставление полученных данных с представленными в литературе обнаружило сходство пигмента штамма 365 с некоторыми другими природными меланинами в отношении присутствия максимумов при 6 и 3 мк в ИК-спектрах.