Индуцирование синтеза тирозиназы у N. crassa


Индуцирование синтеза тирозиназы у N. crassa в «голодной» среде, дефицитной по азоту и углероду (низкое содержание серы также входило в круг обязательных условий) обнаружили Горовиц с сотрудниками (Horowitz et al., 1961а, b). Для получения препаратов высокоактивной тирозиназы культуру следовало выращивать на среде с минимальным количеством серы.

Гирш (Hirsch, 1954), также работавший со штаммами Neurospora crassa, показал, что существует «норма» азота в среде (безразлично в органической или минеральной форме), выше которой тирозиназная активность в мицелии оказывается подавленной, что влечет за собой отсутствие пигментогенеза даже в тех немногих протоперитециях, которые в этих условиях образуются.

При непрерывном культивировании в хемостате Aspergillus nidulans удельная скорость образования меланина значительно возрастала, когда скорость роста по какой-то причине была снижена. В частности, этот эффект был отмечен при лимитировании скорости роста гриба глюкозой (Pirt, Rowley, 1969),

Температура. Ингибирование меланиногенеза у некоторых организмов повышенными температурами свидетельствует о важной роли термического фактора в этом процессе.

Опыты показали, что причина этого явления кроется в резком снижении тирозиназной активности в этих условиях культивирования (Horowitz, Shen, 1952; Hirsch, 1954). Для N. crassa оптимальной для образования пигмента была температура 25°, при 35°—тирозиназная активность оказывалась редуцированной на 95% (Horowitz, Shen, 1952).

Вопрос о сущности этого эффекта остается до сих пор открытым. Предположение о термической инактивации механизма синтеза тирозиназы, выдвинутое первоначально на основании того, что энзим из «25-градусного» мицелия был весьма активным и довольно стабильным при 35°, не подтвердилось в опытах с мутантом, обладающим термостабильной тирозиназой, высокоактивной как при 25°, так и при 35° (Horowitz, Shen, 1952),