Определение локализации мутаций в геноме


Для определения локализации этих мутаций в геноме между отобранными мутантами bm и штаммами с обычным цветом мицелия, маркированными по всем группам сцепления, были сконструированы сбалансированные гетерокарионы. Полученные из них диплоиды не имели коричневой окраски, что указывало на рецессивную природу мутаций bm. На основании анализа гаплоидов, образующихся при расщеплении этих диплоидов, а также мейотического анализа с использованием скрещиваний мутантов bm со штаммами, маркированными по определенной группе сцепления, мутации bm были картированы. Принадлежность локусов bmD (I), bm C(II), bmA (VII), bmB1 и bmB2 (VIII) к группе сцепления указана в скобках. В оригинальной работе графически представлено и их положение относительно известных маркеров внутри групп сцепления.

Авторы полагают, что в случае bmA, bmB1 и bmВ2 они имеют дело с конститутивными мутантами, если истинно предположение, что отсутствие пигментации в норме вызывается репрессором гена-оператора. У мутантов же действие гена-оператора не блокировано, поэтому они осуществляют синтез меланогенного фермента беспрепятственно. Диплоидизация в этом случае приводит к включению в генетический материал репрессора от другого штамма, и поэтому диплоидный мицелий перестает пигментироваться [Vrdoljak, Herman, 1973].

При исследовании генетического детерминирования полиморфизма гриба Asp. heterocaryoticus по цвету конидий (белые и бурые) было показано, что гены wA и bwA локализованы в разных группах сцепления и что ген bwA не соответствует гену уА Asp. nidulans, поскольку не определяет синтеза пара-дифенолоксидаэы, характерной для его конидиегенеза. Вместе с тем была установлена идентичность детерминирования генами wА и bwA цвета конидий у видов Asp. heterocaryoticus и Asp. amstelodami. Мутантные аллели генов wA и bwA у последнего гриба встречаются в природе, по-видимому, очень редко, потому что большинство диких изолятов этого организма имеют зеленые конидии. У Asp. heterocaryoticus — их, напротив, находят довольно часто, иногда даже в пределах одного рисового зерна. В эксперименте у него легко могут быть получены рекомбинантные генотипы с зелеными (wA+, bwA+) или белыми (wA, bwA) конидиями. При УФ-облучении таких зеленых конидий выделяются формы, неотличимые от природных изолятов. Штаммы wA+ bwA+ Asp. heterocaryoticus по формальным критериям полностью соответствуют описанию Asp. amstelodami, который в свою очередь под действием облучения может давать белые и бурые мутанты, идентичные Asp. heterocaryoticus. Кстати, по этим и ряду других соображений в работе делается вывод, что штаммы Asp, heterocaryoticus следует рассматривать только как природные варианты Asp. amstelodami, а не как отдельный таксон [Caten, 1979].