Расхождение данных по ферменту N. crassa


Лерх [Lerch, 1976а] объясняет указанное выше расхождение данных по ферменту N. crassa использованием в расчетах различных молекулярных масс и различных коэффициентов молярной экстинкции при 280 нм. Последний по одним данным [Lerch, 1976а] был равен 22±1, а по другим [Gutteridge, Robb, 1975] -15.

Основной тезис Лерха [Lerch, 1976а] о содержании двух ионов меди на одну функциональную единицу тирозиназы N.crassa получил дальнейшее развитие в специальной работе по изучению состояния меди в этой тирозиназе методом ЗПР [Deinum et al., 1976]. В ней были получены окончательные доказательства того, что рассматриваемый фермент в нативном виде обладает димерной медью Cu II-Сu II, как и фермент высших грибов.

Недавно методами дифференциальной спектроскопии и флуориметрии было изучено обра- зование комплекса между биядерным медьсодержащим центром диоксигенированной формы тирозинаэы N.crassa и окисью углерода (подобно тому, как это было выполнено ранее с гемоцианином). Эксперименты показали, что фермент гриба образует хромофор «медь — СО», способный люминесцировать, причем спектральные параметры этого комплекса весьма близки к спектральным параметрам аналогичного комплекса гемицианина с СО. Отсюда был сделан вывод о структурном подобии активных центров этих двух белков, несмотря на их функциональное различие [Kuiper et аl., 1980].