Окончательные доказательства правильности отнесения детерминанта наследования способности к синтезу тирозиназы у Sir. scabies к категории так называемых плазмид были представлены при установлении факта индукции (до 62%) дефицитных по тирозиназе мутантов (tye-) при обработке культур акридиновыми красками (Gregory, Huang, 1964b). Последние, как известно, действуют специфически на ауторепредуцирующиеся компоненты клеток, изменяя или элиминируя их, но в то же время не влияют на ядерные структуры. Это увеличение частоты мутаций нельзя было приписать селекции существующих мутанта, поскольку tуе—клоны ингибировались более низкими концентрациями акрифлавина, чем клоны tye+. При выяснении природы дефицитности по тирозиназе, т. е. установления тех участков генетического материала, в которых произошли из- менения порядка мутаций, было доказано, что tуе—фенотип не определяется отсутствием синтеза кофактора, необходимого для активности тирозиназы, так как соединение экстрактов «родительского» и мутантного штаммов не приводило к увеличению тирозиназной активности в системе. Он не является также результатом дефекта в конверсии протирозиназы в тирозиназу, так как протирозиназа у Str. scabies вообще не была обнаружена, равно как и следствием действия внутриклеточного ингибитора тирозиназы, концентрация которого у мутантов не отличалась от таковой у исходного штамма, и его удаление не возвращало им тирозиназную активность. Поскольку тирозиназа Str. scabies оказалась не связанной с частицами клетки, то tуе-фенотип не мог возникнуть и в результате дефекта в локализации тирозиназы.

Мутация не затронула и окислительных энзимов вообще в отличие от дыхательных мутаций дрожжей, так как окисление глюкозы и сукцината осуществлялось без помех. Никаких следов тирозиназной активности не обнаруживалось у tуе-штаммов, выращенных в присутствии ароматических аминокислот, которые были способны индуцировать образование тирозиназы у штамма Neurospora crassa с мутациями двух генов-регуляторов, контролирующих тирозиназную активность (Horowitz et аl., 1961). Данные, полученные методом исключения возможностей, позволили авторам заключить, что акрифлавин индуцирует потерю или повреждение структурного гена, ответственного за образование тирозиназы.

Таким образом, наследование тирозиназы и, следовательно, способности к меланиногенезу у актиномицета Str. scabies, в отличие от двух изученных в этом отношении грибов — Neurospora crassa и Glomerella cingulata,— контролируется фактором, относящимся к категории детерминантов цитоплазматической наследственности.

Насколько это положение является общим для всей группы меланогенных актиномицетов сейчас сказать невозможно, так как Str. scabies был до сих пор единственным организмом этой группы, изучавшимся с этой точки зрения.