Термоиндуцированный лизис клеток Вас. psychrophilus также своеобразен и пока представляется уникальным по своему характеру. Не удалось установить ни оптимальную, ни максимальную температуры лизиса: чем выше была температура, тем быстрее и сильнее происходил лизис как целых клеток, так и изолированных клеточных стенок. Гидролиз специфических связей пептидогликана клеточной стенки ферментами, локализующимися в ней самой (т. е. автолитическая реакция), протекает при температурах, благоприятных для роста (т. е. ниже 30°), подчиняется обычной кинетике реакций нулевого порядка и не реагирует на введение в инкубационную систему L-аспарагиновой или других аминокислот. Эта ферментная активность (по-видимому, а-ацетил-L-аланинамидазы) ингибируется или инактивируется высокими концентрациями LiCl (10M). Обычно она неодинакова по величине у клеток культур экспоненциальной и стационарной фаз. Автолизимы гидролизуют практически все связи в муреине за исключением связи L-аланин-а-глютамил. Но как только температура инкубации превышает максимальную температуру роста, автолизины инактивируются, и картина лизиса меняется: скорость процесса резко возрастает, кинетика нулевого порядка исчезает, лизис приостанавливается различными аминокислотами и клетки культур из экспоненциальной и стационарной фаз лизируются одинаково хорошо. Введение в систему 10 М LiCl (для блокирования активности автолизинов) практически не влияет на скорость и степень лизиса при этих температурах и терминальные группы почти полностью перестают освобождаться. Таким образом, наступает неферментативный этап лизиса. Эффект pH, специфическое ингибирование диссоциации клеточных стенок Са2+, их чувствительность к воздействию ЭДТА заставляют предполагать участие не только ковалентных, но и термолабильных ионных связей в обеспечении целостности клеточной стенки этого психрофила. Природа ионных мостиков неизвестна, возможно участие ионов Са++. Белковый слой клеточной стенки, связанный с остальной частью ионными связями, при повышенных температурах растворяется, но может быть присоединен вновь за счет феномена реагрегации. Все это указывает на физическую диссоциацию клеточных стенок, происходящую при температурах выше максимальной температуры роста. Таким образом, можно говорить о двух механизмах термолизиса клеток Вас. psychrophilus, каждый из которых преобладает или исключает другой в зависимости от того, находятся ли клетки в благоприятном или ограничивающем их рост диапазоне температур (Mattingly, Best, 1971; 1972а, b; Best, Mattingly,1973).

325