Обсуждение проблемы модифицирующего действия различных соединений на меланиногенез и тирозиназную активность микроскопических грибов чрезвычайно затруднено крайней недостаточностью и разрозненностью имеющихся фактов. Данные, представляющие интерес с точки зрения поднятого вопроса, были получены на разных объектах, с разными целями и на разном материале (мицелиальный организм или клетка — энзиматически активный экстракт — очищенный препарат). К тому же были проверены далеко не все известные группы (по типу действия) веществ, влияющие на тирозиназу и меланиногенез у более высоких форм жизни, что осложняет рассмотрение вопроса в сравнительно — биохимическом плане.
Данные о механизме действия различных известных ингибиторов этих процессов представлены в обзоре Лях (1970) и в случае необходимости могут быть привлечены в качестве справочного материала.
Действие ингибиторов in vivo. Круг веществ, известных как ингибиторы различных тирозиназ in vitro, очень широк. Однако при изучении их влияния in vivo он неизбежно сужается из-за токсичного действия многих из них на живые, активно метаболизирующие клетки. Нельзя не учитывать также возможность превращения некоторых веществ растущей микробной культурой и их «самоизменения» в такой сложной системе, как среда для культивирования. Кроме того, энзимология знает немало примеров, когда ингибиторы, чрезвычайно активные в отношении изолированных энзимов, оказываются совершенно неэффективными в экспериментах с энзимами, включенными в биологический материал.
Поиски ингибиторов, специфически влияющих на тирозиназу и биосинтез пигмента без существенного затрагивания иных функций микробной клетки (главным образом ее нормального роста), были вызваны необходимостью подойти к выяснению вопроса о физиологической роли тирозиназы и о функциональном значении меланизации у микроорганизмов.
В «вегетативном» метаболизме некоторых грибов процессы, определяющиеся активностью тирозиназы, по-видимому, не играют заметной роли, и тирозиназа не является жизненно необходимым энзимом. Предположение о деятельном участии тирозиназы в морфологической и функциональной дифференциации у N. crassa нашло подтверждение в экспериментах с ингибиторами, когда было установлено, что при введении в среду веществ, известных как ингибиторы тирозиназы (парааминобензойная кислота (3,6 • 10-2 М), тиогликолят натрия (3,8 • 10-2 М ) , цистеин (10-2 и 5 • 10-4 М ) и фенилтиомочевина (3,9- 10 -8М)), образование протоперитециев и их меланизация резко ингибировались. Рост при этом во всех случаях был таким же, как в контроле или несколько более слабым (с тиогликолятом, фенилтиомочевиной и цистеином в концентрации 10-2 М) (Hirsch, 1954).