Ингибирование тирозиназной активности у микроскопических грибов (эксперименты in vitro). Практически единственной группой ингибиторов тирозиназы, которая испытывалась на неклеточном микробном материале, явились соединения, хелатирующие медь. Энзиматическая активность экстракта мицелия N. crassa полностью подавлялась цистеином и диэтилдитиокарбаматом в концентрации 10-3 М (Horowitz, Shen, 1952). В отношении препаратов тирозиназы (клеточный экстракт) цистеин оказался активным и при более низких концентрациях —10-4 и 10-5 М (Schaeffer, 1953).

Ингибиторами изолированной тирозиназы гриба Fusarium vasinfectum выступали пара-хлор- меркурбензоат, диэтилдитиокарбамат, ЭДТА и йодбензойная кислота, в то время как аскорбиновая кислота, цистеин и глутатион заметно активировали энзим (Ramakrishna Rao, Shanmugasundarum, 1967). Рассматривая первую группу веществ как ингибиторы тиоловой группы, авторы делают заключение о том, что тирознназа Fusarium vasinfeсtum является тиоловым энзимом.

Сусман (Sussman, 1961) изучал действие ингибиторов на высокоочищенной препарат тирозиназы N. crassa, рассчитывая получить данные о структурных различиях двух форм тирозиназ — термостабильной и термолабильной, отличающихся также и по электрофоретической подвижности. Одинаковый ответ на действие некоторых ингибиторов, как н одинаковая субстратная специфичность, свидетельствовал о том, что они не отличаются по активным центрам. Сильными ингибиторами показали себя Cu- связывающне агенты — фенилтиомочевнна, диэтилдитиокарбамат, цистеин и азид натрия. Промежуточные соединения биосинтеза ароматических аминокислот хинная и шикимовая — не ингибировали энзима, даже будучи взятыми в очень высоких концентрациях. И только мочевина (9—12—14 М) и формамид (10-1М ) , которые вызывают раскручивание белковой молекулы, инактивировали оба энзима, но в разной степени. На этом основании было высказано предположение о существовании различий во вторичной н третичной структурах двух форм энзима. Ни цистеин, ни цистин в энзимном белке не были обнаружены. Данные об отсутствии в энзиме цистеина согласуются с его нечувствительностью к парахлормеркурбензоату, связывающему группы — SH.

Реакции окисления и полимеризации пирокатехина полифенолооксидазой лакказного типа гриба Stemphilium sarcinaeforme ингибируются а- и b-нафтолом, 2,4-днокснтетрафталевой кислотой, 3,5-дийодтирозином, гексилрезорцином и 2-хлор-4,6- динитрофенолом. Тирозиназа Monilinia fructicola (также в виде мицелиального экстракта; субстрат—-пирокатехин) резко подавлялась циклогексилгидрохиноном, гексилрезорцином и гентизинатом натрия (Rich, Horsfall, 1954).