Участие тирозиназы в образовании клеточного меланопигмента Nadsoniella nigra


Присутствие в среде фенилтиомочевины (10-3 М), как сильного ингибитора меланиногенеза, препятствовало развитию (созреванию) склероциев и их меланизации у Sclerotium rolfisii (Chet, Henis, 1968b).

Если ингибиторы тирозиназы не влияли на пигментацию, то это служило обоснованием для утверждения об отсутствии этого энзима у данного микроорганизма. Так, например, при идентификации энзимной системы, ответственной за образование черного пигмента у Verticillium alboatrum (Heale, Isaac, 1964), такой ингибитор тирозиназы, как тиомочевина, введенная в среду в количестве 50, 100, 500, 1000 и 2000 мг/л, вызывала прекращение пигментации только при условии значительного угнетения роста мицелия при двух последних концентрациях. Эти данные свидетельствовали о том, что тирозиназа не является энзимом, необходимым для развития пигментации у Verticillium alboatrum, поскольку удаление ионов Cu+2 не влияло на энзимную систему, определяющую пигментацию в нормальных условиях. Культуры с N-ацетилтирозином (250 мг/л), конкурентным ингибитором тирозиназы, также не отличались от контрольных. Положительные результаты с аскорбиновой кислотой (ингибировала пигментогенез) не могут сами по себе доказать присутствия тирозиназы, поскольку ее воздействие на пигментогенез, как полагают, осуществляется главным образом на неэнзиматических этапах.

Возможное участие тирозиназы в образовании клеточного меланопигмента Nadsoniella nigra проверяли действием in vivo соединений, известных в качестве ингибиторов этого энзима, чтобы добиться избирательного торможения пигментогенеза без подавления функции роста этого микроорганизма и получить косвенные доказательства наличия у него «типичной» тирозиназы (Лях, 1970). Принадлежность выявленного ингибитора к группе известного типа действия дала бы возможность судить о механизме торможения.

Ингибиторы применяли в концентрациях от 10-4 до 10-1 м путем введения в различные питательные среды.