Синтез внеклеточного меланиноподобного пигмента штаммом «черных дрожжей» NRRL-6272, идентифицированных позднее как Rhinocladiella (=Cladosporium) mansonii [Burton et al., 1976], изучался в связи с необходимостью избавиться от этого процесса при производстве внеклеточного полисахарида. В данной главе мы рассмотрим только материалы чисто биологического свойства.

Сведения прикладного характера вынесены в главу 5.
Ключевым моментом, определявшим накопление пигмента в среде и в клетках, являлось присутствие среди питательных ингредиентов L-аспарагина. Процесс стимулировался также внесением в среду нативного альбумина бычьей сыворотки. После автоклавирования препарата его действие становилось отрицательным. Механизм этих эффектов специально не исследовался. Далее было показано, что внеклеточный пигмент, образующийся в присутствии альбумина бычьей сыворотки или других растворимых белков, имел меланопротеидную структуру, точнее, вел себя как комплекс белка и хромогена. Исходя из ряда корреляций, авторы предполагают, что образо- вание черного пигмента и синтез полисахаридов у Rhinocladiella mansonii метаболически тесно связаны. Во всяком случае, добавление к среде известных ингибиторов тирозиназы и меланиногенеза или создание условий культивирования, блокирующих синтез пигмента, неизменно приводило к уменьшению или прекращению продуцирования полисахарида. Последний процесс оказался частично нарушенным и у розовых мутантов, полученных от исходного штамма с помощью УФ-облучения: синтезировалось или меньше полисахарида или по производственным показателям он был худшего качества. При работе с исходным штаммом наблюдались трудности в очистке полисахарида от пигмента. Неэффективность обработки проназой или папаином могла указывать на ингибирование меланином активности этих ферментов или на столь значительное изменение белка при его соединении с хромогеном, что он становился устойчивым к ферментативному расщеплению [Sanford et al., 1975].