Биосинтез «гумино-подобного» вещества грибом Eurotium echinulatum


Методически сходно разрабатывался вопрос о биосинтезе «гумино-подобного» вещества грибом Eurotium echinulatum. Его образование на средах с глюкозой и аспарагином становилось заметным через 18-20 дней после начала инкубации и достигало максимума (3 г/л) через 3 мес. Фенолы и антрахиноны, выявленные в культуральной жидкости среди прочих продуктов метаболизма, в период активного синтеза пигмента исчезали из нее, может быть, из-за потребления на синтез пигмента. Считается, что превращения, завершающиеся появлением полимера, могут осуществляться как ферментативным путем, так и автоокислительным, причем выбор пути определяется значениями pH среды. Последние же в свою очередь в значительной мере зависели от использования органической или минеральной форм азота; в первом случае культивирование завершалось с pH 7,8, во втором — с pH 4,2. Основными компонентами, идентифицируемыми в культуральной жидкости в период, предшествующий образованию полимеров, являлись диокситолуолы, синтез которых осуществлялся по поликетидному пути. Их предшественниками выступали орселлиновая, 3-метилорселлиновая и 5-метилорселлиновая кислоты. В синтезе темного пигмента, участвовали также антрахиноны, частично (9% мол. массы) входившие в дальнейшем в его состав [Saiz-J imenez, 1975, 1977; Saiz-Jimenez, Martin, 1975; Saiz-Jimenez et al., 1975; Саиз-Гименес, Мартин, 1978].  Фенолы, полимеризующиеся в макромолекулярные полифенольиые соединения, характерны также для метаболизма гриба Asp. flavus, придающего темно-коричневый цвет многим средам, на которых он растет. Оптимальными условиями для образования подобных веществ была достаточная аэрация (создающаяся при поверхностном культивировании), освещение белым светом, температура не выше 22°, среда Чапека-Докса (pH 7,0) с 5 частей млн Mg+2 и Zn+2 и 1% сахарозы. Ускоряющий эффект при образовании «гуминовызх кислот» оказывали пирокатехин, гидрохиноны, орцин и фталиевая кислота. Последняя (в концентрации 0,1%) применялась для изучения биологического процесса, поскольку это исключало возможность аутоокисления субстратов, вполне реального с первыми из названных веществ при повышении pH среды. Легко заметить, что все эти модельные субстраты содержали две гидроксильные или две карбоновые группы, связанные напрямую с ароматическим ядром [Visser, 1968, 1970].