При обсуждении материалов по названному в заглавии вопросу прежде всего необъодимо отметить получение доказательств ранее высказанного предположения о существовании активной тирозиназы у Bacillus subtilia var. niger. Как оказалось, фермент этого организма состоит из трех электрофоретических форм, соотношение которых значительно варьирует по фазам роста культуры. Препарат из клеток ранней экспоненциальной фазы давал только одну слабо выраженную полосу, затем набор изоферментов пополнялся двумя другими компонентами. Реэлектрофорез позволил разделить наиболее быстро идущую полосу еще надвое. Взятый для сравнения немеланогенный штамм Вас. subtilis также имел тирозиназную активность, но очень слабую и электрофоретически однокомпонентную [Lechner, Fuscaldo, 1970].
Различия между ферментами двух форм организмов могли быть выявлены и в экспериментах с окисляющими агентами. Так, персульфат аммония, добавленный в систему, предназначенную для измерения активности тирозиназы, в обоих случаях интенсифицировал действие последней, но активность Вас. subtilis var. niger возрастала в 7 раз, а Bac. subtilis — только в 3 раза. Аналогичный стимулирующий эффект был получен на препаратах, инактивированных диализом против сахарозы. Если же персульфат присутствовал во время диализа, то потери активности вообще не наблюдалось. Полагают, что эта картина может быть объяснена исходя из стимуляции действия каких-то еще не идентифицированных кофакторов фермента [Chang et al., 1971].
Далее было показано, что тирозиназная активность у меланогенного штамма быстро нарастает, начиная с ранней экспоненциальной фазы роста, а затем столь же быстро падает при переходе культур в стационарную фазу, к концу которой она становилась минимальной. Результаты количественного сопоставления динамики размера клеточного пула тирозина (субстрата фермента) и динамики тирозиназной активности могли быть легко истолкованы с точки зрения использования запасов тирозина на синтез меланинового пигмента. В то же время между размером пула тирозина и размером популяции клеток соотношение было обратно пропорциональным. Ана- логичные исследования с фенилаланином — веществом, не являющимся субстратом тирозиназы, такой специфической закономерности не выявили [Lechner et al., 1972].