Психрофильный морского штамм Pseudomonas sp. 548


Для психрофильного морского штамма Pseudomonas sp. 548 температурные оптимумы синтеза белка и роста отстояли друг oт друга на 15 (5 и 20°). При 30° синтез белков-ферментов становился едва заметным, полностью прекращаясь при 35°, при которых организм еще мог слабо развиваться. Причина кроется в термолабильности процесса синтеза, а не готового фермента — последний при этих температурах функционировал вполне нормально. Авторы полагают, что повышение температуры неблагоприятно влияет само по себе, а не через снижение уровня растворенного в среде кислорода, как это было ранее показано в отношении выхода биомассы на некоторых других объектах. Ферментный белок, осажденный из культуральной жидкости, разделялся на колонке ДЭАЭ-целлюлозы на две фракции.

При увеличении температур прослеживалась тенденция к резкому снижению накопления фракции II. Соотношения фракций I: II -при температурах 10, 20, 25° составляли 3: 1, 6: 1. 12:1, соответственно. Каждая из фракций хроматографически могла быть повторно разделена на две. Протеаза 1а была выделена в кристаллическом виде и вела себя как гомогенный белок, протеазы Iб, а IIа и II б состояли из 2—3 белков. Все ферменты были примерно одинаковой степени термолабильности, но имели разные оптимумы активности: 30° для протеаз Iа Iб и II б и 50° — для протеазы IIа (Kato et al., 1972а, b).

У Ps. fluorescens синтез внеклеточных протеолитических ферментов интенсивнее всего происходил при 0°, снижаясь по мере повышения температуры культивирования. Активность внутриклеточных протеиназ этих бактерий (на 1 мг белка) была выше у клеток, выросших при низкой температуре по сравнению с теми, которые росли при высоких. В то же время максимальная активность самого фермента наблюдалась при достаточно высоких температурах, что свидетельствовало о его термостабильности (Peterson, Gunderson, 1960).