Жидкая питательная среда


Дополнение жидкой питательной среды (2-С14)-ДОФА приводило к еще более интенсивному переходу С14 в состав пигмента. На этом основании предположили, что ДОФА является интермедиатом синтеза меланина по обычной схеме [Shieh, MacLean, 1974]. Ей также соответствует порядок изменения окраски среды с тирозином под действием развивающейся культуры, тогда как сами колонии долгое время остаются бесцветными и только с возрастом становятся светло-коричневыми. Пигментогенез осуществляется только в присутствии кислорода. Более того, после предварительного анаэробного культивирования организма требуется не менее 24-48 час усиленной аэрации, чтобы в среде образовались заметные количества пигмента. Процесс имеет лаг-фазу (индукционный период) и однозначно зависит от pH, Температура же влияет на различные его стадии по-разному. Фермент лучше образуется при повышенных температурах, но ферментативное окисление предшественников пигмента происходит в максимальной степени при температурах пониженных. Что же касается аутоокисления, то оно усиливается с нагреванием системы. В целом на уровне организма температуры выше 22° ингибируют меланиногенеэ, и хороший рост при 32° уже не сопровождается синтезом пигмента [Griffin, 1952; Griffin et al., 1953a, b]. Это ограничение предложено учитывать при оценке «хромогенного теста», применяющегося при дифференциации Ае. salmonicida от некоторых других пигментообразующих организмов [Hamilton-Willer, 1975].

Снимают или подавляют образование меланина у Ае. salmonicida также аскорбиновая кислота и цистеин [Shieh, MacLean, 1974].

Эти же ингибиторы меланиногенеза (в концентрации 0,33%) препятствуют образованию пигмента и у Ае. liquefaciens, хотя в этом случае оптимальная для образования пигмента температура была одновременно оптимальной и для роста организма. Отличает этот организм от Ае. salmonicida и непригодность DL-фенилаланина служить субстратом для его хромогенного фермента. В то же время синтез пигмента только в аэробных условиях, переход окраски среды с тирозином от бесцветной к розовой, красной, коричневой и, наконец, к черной, наличие «индукционного периода», благоприятность щелочных pH среды и ряд других черт, общих с условиями пигментогенеза у Ае. salmonicida, — все это дает право говорить о большом сходстве меланогенных механизмов у обоих сравниваемых организмов. В приведенной характеристике нетрудно усмотреть также аналогию с признаками, описанными другими исследователями для типичной тирозиназной реакции. Наглядное представление о свойствах меланина, синтезирующегося Ае. liquefaciens, дает следующая схема [Aurstad, Dahle, 1972а].

Screenshot at марта 21 11-15-43