Гидроксилирующая активность


Подчеркивается его высокая удельная гидроксилирующая активность, превышающая величины, известные для других тирозиназ, а также явление гетерогении, отмеченное и у других грибных фенолоксидаз (Bull* Faulkner, 1965; Булл, 1966; Carter, Bullr 1967, 1969а). На последнем явлении остановимся подробнее, поскольку вопрос о существовании множественности молекулярных форм одного энзима в последние годы привлекает все большее внимание. У одного из диких штаммов Asp. nidulans было найдено 4 компонента тирозиназы изоферментного характера (Carter, Bull, 1969). При исследовании штамма BWB224 методом диск электрофореза в полиакриламидном геле удалось выявить пять зон белков, обладающих ДОФА-оксидазной активностью. По мере развития культуры (в стационарных условиях) спектр изоэнзимов (число и относительные количества) меняется. В течение активного роста их число возрастает, достигает максимума в стационарной фазе и уже не меняется при автолизе, в момент усиленного депонирования меланина в клеточной стенке. Дифференциальное центрифугирование показало, что изоэнзимы, с одной стороны, специфически связаны с различными фракциями частиц, а с другой — все присутствуют в растворимой фракции. Их распределение в пределах клетки на различных стадиях жизненного цикла организма остается постоянным, хотя число компонентов энзима на каждой стадии, как уже было сказано неодинаково. Сходство форм дифенолооксидазы по субстратной и ингибиторной специфичности указывает на их родство. При мутациях набор меняется. Так, у высокомеланизированных мутантов число компонентов энзима невелико, у одного из бесцветных мутантов оно возросло до 6. Известно, что спектр изоэнзимов у разных штаммов дикого типа Asp. nidulans неодинаков, причем последние по этому признаку могут быть даже объединены в несколько групп (Martinelli, Bainbridge, 1969).